马里奥（克里斯·帕拉特暂无内容Chris暂无内容Pratt暂无内容配音）和路易吉（查理·戴暂无内容Charlie暂无内容Day暂无内容饰）是生活在布鲁克林的两名水管工，他们刚刚成立了自己的小公司，但很显然，他们的家人并不完全支持兄弟两人的这份事业某日，在工作中，马里奥和路易吉被水管吸入到了一个光怪陆离的世界之中，两人在旅途中被迫分开，马里奥来到了由桃花公主（安雅·泰勒-乔伊暂无内容Anya暂无内容Taylor-Joy暂无内容配音）统治的蘑菇国，而路易吉则不幸的被传送到了由酷霸王（杰克·布莱克暂无内容Jack暂无内容Black暂无内容配音）统治的库巴国。